研究目的：明确NSCLC中未受累的肿瘤引流淋巴结（uiLNs）和转移淋巴结（metLNs）之间的免疫学差异，并探究其对纵隔淋巴结选择性清扫术及新辅助PD-1抑制剂免疫治疗的临床指导意义。

研究方法：纳入未经治疗及接受新辅助PD-1抑制剂治疗患者的106例配对标本（原发肿瘤、uiLNs、metLNs及外周血）构建转化研究队列，开展单细胞RNA测序、T细胞受体/B细胞受体谱系分析及空间转录组测序。分析免疫细胞组成、功能状态、淋巴结-肿瘤轴系的克隆共享特征与空间微环境群落结构，并通过过继细胞转移实验对核心研究结果进行功能验证。

研究结果：uiLNs与metLNs存在截然不同的免疫微环境特征。uiLNs中富集活化CD8⁺T细胞与树突状细胞，细胞毒性/效应分子特征表达更高、T细胞受体克隆性更强且具有祖细胞表型。metLNs中调节性T细胞增多、T细胞耗竭程序激活，成纤维细胞与上皮细胞富集，提示肿瘤已发生浸润。PD-1抑制剂治疗后，CD200⁺祖细胞耗竭型CD8⁺T细胞亚群在uiLNs中显著扩增（约2.2倍），但在metLNs中无同等扩增效应。病理完全缓解患者的uiLNs与肿瘤组织间，耗竭型T细胞/祖细胞耗竭型T细胞的克隆共享水平显著更高，证实uiLNs来源的T细胞克隆可补充肿瘤内效应T细胞库，而metLNs贡献的共享克隆数量更少、功能更弱。空间组学分析发现，肿瘤原位C1QA⁺树突状细胞可分泌CXCL9/10，并与耗竭型T细胞共定位形成免疫刺激微环境，促进uiLNs的T细胞向肿瘤组织募集。与之相反，metLNs内存在成纤维细胞富集的微环境区域TpCN5，胞外基质形成物理屏障，抑制CXCL9扩散并阻碍祖细胞耗竭型T细胞浸润。体内实验证实，过继回输的CD200⁺祖细胞耗竭型T细胞可分化为效应T细胞，并与PD-1抑制剂产生协同作用，有效抑制肿瘤生长。

研究结论：uiLNs是具备完整免疫功能的储备库，可在PD-1抑制剂干预下生成并输出肿瘤反应性T细胞克隆。metLNs呈免疫抑制状态，可形成屏障结构并耗竭免疫细胞。二者功能差异为淋巴结选择性清扫策略提供理论依据：手术中切除metLNs、保留uiLNs，既能降低手术并发症发生率，又可保留机体免疫功能体系，提升可手术NSCLC新辅助免疫治疗的疗效。