2025年6月17日发表于

Immunity, Inflammation and Disease

摘要

背景

NK 细胞是一类先天性淋巴细胞，能够非特异性地杀伤肿瘤细胞，无需 MHC 限制或事先致敏。近年来，生物技术的进步，尤其是嵌合抗原受体 (CAR) 及其相关技术的开发，使得靶向清除肿瘤细胞成为可能。CAR 赋予 NK 细胞增强的功能，其胞外域通常由单链可变区 (scFv) 组成，用于靶向特定抗原。CAR-NK 细胞已在多项针对血液系统恶性肿瘤的临床前研究和临床试验中展现出优异的效果。然而，其在实体瘤治疗中的临床应用仍然不足。目前，妇科癌症的治疗主要包括手术、化疗和放疗，这些疗法通常副作用较大且疗效参差不齐。虽然 CAR-T 细胞疗法已在某些妇科肿瘤中显示出疗效，但其严重的副作用，例如细胞因子释放综合征 (CRS) 和移植物抗宿主病 (GVHD)，阻碍了其临床应用。 CAR-NK 细胞疗法在临床应用中具有更高的安全性。

客观的

本综述旨在系统地评估 CAR-NK 工程的最新方法创新及其在肿瘤靶向治疗中的转化潜力，为临床试验和研究提供有价值的见解。

方法

检索PubMed、Web of Science等电子数据库，查找相关文献。关键词：CAR-NK细胞；嵌合抗原受体；实体瘤；细胞疗法；妇科癌症。

结果

与CAR-T细胞相比，CAR-NK工程具有多靶点CAR设计、增强持久性的基因编辑以及“现成的”CAR-NK细胞等创新。

结论

CAR-NK细胞疗法兼具安全性和抗肿瘤功效，尤其针对妇科癌症。

1. 简介

自然杀伤 (NK) 细胞占外周血淋巴细胞的 10% 到 15%，其表面标志为 CD3−CD56+，它们能够有效进行免疫监视，并在无需抗原特异性 MHC 限制或事先致敏的情况下消灭癌细胞，从而介导先天免疫。大约 90% 的循环 NK 细胞是成熟的 CD56 dimCD16 bright 细胞，主要负责介导细胞毒性免疫反应。其余 10% 是未成熟的 CD56 brightCD16 dim NK 细胞，主要作为细胞因子产生者（特别是 IFN-γ）介导免疫调节功能。NK 细胞活化不是由单个分子开关或信号通路调控的二元过程。激活和抑制受体信号之间的平衡决定了 NK 细胞的细胞毒潜力。在宫颈癌的临床试验中进行了评估。肿瘤微环境含有多种损害 NK 细胞功能的抑制机制，包括免疫抑制细胞成分（树突状细胞、调节性巨噬细胞、Treg 细胞、髓系来源的抑制细胞 (MDSC) 和癌症相关成纤维细胞）；以及可溶性因子，如吲哚胺 2,3-双加氧酶 (IDO)、转化生长因子-β (TGF-β) 和前列腺素 E2 (PGE2)。

CAR-NK 细胞是通过将嵌合抗原受体 (CAR) 基因引入 NK 细胞而产生的。CAR 结构包含胞外识别结构域和胞内信号传导区。胞外结构域通常由单链可变片段 (scFv) 组成，使 CAR-NK 细胞能够特异性地识别靶细胞。胞内区域主要包含多个信号传导结构域。第一代 CAR 分子依赖于单个信号传导结构域，但其功能有限且持久性差，促使开发了第二代和第三代 CAR。这些先进的一代 CAR 整合了一个或多个共刺激结构域，增强了 CAR-NK 细胞的活力和胞内效应信号传导。最近，已经开发出整合了细胞因子有效载荷的第四代 CAR 分子，这可能为更有效的临床应用铺平道路。

虽然早期妇科癌症主要通过手术治疗，但晚期妇科癌症的治疗选择——无论是手术、放疗、化疗、靶向治疗还是免疫治疗——仍然有限。鉴于CAR-T疗法在血液系统恶性肿瘤中显示出良好的治疗效果，CAR技术在妇科癌症治疗中具有巨大的潜力。

CAR-T 细胞疗法已获得美国食品药品监督管理局 (FDA) 的批准，用于治疗血液系统恶性肿瘤，并显示出显著的临床疗效。然而，该疗法与严重的副作用相关，包括移植物抗宿主病 (GVHD) 和细胞因子释放综合征 (CRS)。CAR-T 细胞激活过程中会释放高水平的炎症细胞因子，例如 IL-6 和 IL-10，可引发全身炎症，增强免疫细胞活化，并增加血管通透性，从而导致发烧和器官损害等症状。考虑到需要 CAR-T 细胞疗法的患者血液中可能存在肿瘤污染，因此通常首选同种异体 CAR-T 细胞。然而，T 细胞表面受体与接受者的 MHC 分子不匹配可能导致对宿主细胞的细胞毒性，从而引发 GVHD。

近年来，CAR-NK细胞疗法在实体瘤治疗中越来越受到关注。虽然CAR-NK细胞在实体瘤应用中尚未得到充分利用，但有希望的临床前研究和临床试验表明其具有巨大的潜力。作为CAR-T疗法的替代方案，CAR-NK细胞疗法在先前的研究中显示出良好的安全性，并且对恶性肿瘤具有相当的疗效。本综述探讨了NK细胞的基础作用，介绍了CAR构建体的设计和优化，并分析了CAR-NK细胞用于恶性肿瘤治疗的已完成和正在进行的临床和临床前研究。对CAR-T疗法和CAR-NK疗法的比较分析将突出推进CAR-NK细胞疗法的潜在价值，特别是在治疗妇科癌症等实体瘤方面。

2. NK细胞在正常免疫机制中抗癌的基础作用

NK 细胞是先天性淋巴细胞，无需事先致敏即可识别和裂解转化细胞或病毒感染细胞。它们的活化状态由抑制性受体和活化性受体之间的平衡决定。图1显示了 NK 细胞的功能模型。正常情况下，NK 细胞上的抑制性杀伤免疫球蛋白 (Ig) 样受体 (KIR) 与健康细胞上的主要组织相容性复合体 I 类 (MHC I) 分子相互作用，从而阻止 NK 细胞活化。相反，病毒感染和恶性细胞通常会下调 MHC I，导致 KIR 脱离，随后 NK 细胞效应功能被激活以对抗“非自身”细胞。这种 NK 细胞识别机制与 T 细胞介导的针对靶细胞的反应形成对比。活化的 NK 细胞分泌穿孔素和颗粒酶；穿孔素会破坏靶细胞膜，促进颗粒酶进入，从而诱导细胞凋亡。此外，NK 细胞还可以通过将靶细胞上的“死亡受体”与死亡配体（如 FasL 和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)）结合来触发细胞凋亡，导致直接靶细胞裂解。尽管 NK 细胞的细胞毒作用是非抗原特异性的，但它可以通过抗体依赖性细胞毒作用 (ADCC) 针对异常细胞。在此过程中，抗体与靶细胞上的抗原结合，暴露出 IgG 的 Fc 区，该区与 NK 细胞上的 Fc 受体（特别是 CD16 和 CD32）相互作用。这些受体的激活会导致脱颗粒和细胞毒颗粒的释放，诱导靶细胞凋亡。TNF 不仅促进肿瘤细胞凋亡，还能刺激 NK 细胞分泌 IFNγ，通过增加颗粒酶和穿孔素的释放来增强其细胞毒活性。除了直接的细胞毒性外，NK 细胞还通过产生 IFN 和 TNF 募集 T 细胞和巨噬细胞至感染部位。然而，TGF-β 会抑制 NK 细胞功能，这表明使用 YM101 或 M7824 等靶向 TGF-β 的药物可能增强 NK 细胞活性。NK 细胞是先天免疫系统的关键效应细胞，无需肿瘤特异性抗原呈递即可裂解肿瘤细胞。

图1. 自然杀伤 (NK) 细胞的功能 | NK 细胞表达多种具有激活或抑制功能的受体，激活和抑制信号的平衡控制着 NK 细胞细胞毒作用的激活或非激活。正常细胞表面表达 MHC-I 分子，当 NK 细胞上的抑制性受体与这些分子结合时，NK 细胞的功能受到抑制，其细胞毒性也受到抑制 (A)。在异常细胞（例如肿瘤细胞）中，其 MHC-I 分子通常下调，而 NK 细胞激活受体（例如 NKG2DL 等）的配体通常上调。激活配体与激活受体（例如 NKG2D）的相互结合导致抑制信号的缺失，而激活信号的增强则诱导 NK 细胞的激活并对靶细胞产生细胞毒性。细胞因子的释放募集其他免疫细胞（例如巨噬细胞等）可增强免疫反应（B）。此外，NK细胞通过与靶细胞结合的CD16识别抗体被激活，并通过ADCC作用对靶细胞发挥细胞毒作用（C）。

3. CAR-NK细胞的构造以及CAR-NK与CAR-T细胞的区别

CAR-T 细胞疗法的细胞来源包括自体外周血、同种异体来源、脐带血或诱导多能干细胞 (iPSC) 分化来源。然而，由于脐带血和 iPSC 来源的可用性有限且制备过程复杂，本综述不予考虑。需要 CAR-T 治疗的患者外周血质量参差不齐，可能存在肿瘤污染，因此同种异体 T 细胞是首选。然而，由于供体的 T 细胞的 TCR 与受者的 MHC 分子不匹配，同种异体来源的 T 细胞可能存在移植物抗宿主病 (GVHD) 的风险，从而导致对正常组织的细胞毒性。相比之下，NK 细胞的激活不依赖于 MHC I 类分子，因此同种异体 NK 细胞移植是一种更安全的替代方案，因为它不会诱发 GVHD 或其他同种免疫或自身免疫毒性。此外，当自体 NK 细胞用于过量治疗时，它们与自体细胞上的 MHC 分子相互作用会产生抑制信号，防止正常组织受损。这一特性使得可以使用来自健康供体的“现成”同种异体 NK 细胞。

虽然CAR-T细胞的出现彻底改变了肿瘤免疫疗法，但需要考虑的一个主要副作用是细胞因子释放综合征 (CRS)，即T细胞释放高水平的促炎细胞因子，例如IL-6和IL-10，这可能导致非肿瘤组织损伤。由于NK细胞活化和信号通路的差异，基于NK细胞的疗法发生CRS的风险显著较低。

T细胞的寿命相对较长，在前文讨论的严重毒性背景下，这种延长的寿命使脱靶效应的管理更加复杂。为了降低这些风险，可能需要引入自杀基因来调节过度的免疫反应。相比之下，NK细胞的寿命较短，即使不使用自杀基因，也能自然降低持续“脱靶”效应的风险。然而，NK细胞的存活期有限，因此需要进一步评估和提高CAR-NK细胞疗法的持久性和整体疗效。下文概述了改进这一方案的潜在策略。

就其细胞毒机制而言，CAR-T细胞依赖于CAR识别肿瘤抗原，并通过T细胞受体（TCR）激活其杀伤功能。然而，肿瘤细胞通常会下调其表面的MHC I类分子，从而限制TCR的有效性。相比之下，CAR-NK细胞可以绕过这一限制。即使肿瘤细胞下调MHC I类分子，CAR-NK细胞仍然可以通过“缺失自我”途径发挥其细胞毒作用，利用其固有免疫力清除肿瘤细胞。

此外，与 CAR-T 细胞不同，CAR-NK 细胞采用的胞内共刺激结构域并非完全依赖于 CD3ζ 通路。这些结构域包含三种基于免疫受体酪氨酸的活化基序 (ITAM)。DAP12 是一种与 NK 细胞受体相关的特殊连接分子，它包含一个可与 Syk 和 ZAP70 激酶相互作用的 ITAM，从而增强 NK 细胞活化和细胞因子释放，这与 T 细胞中基于 CD3ζ 的信号通路相反。值得注意的是，将 NKG2D 作为 CAR 的胞外识别结构域与 DAP12 作为胞内信号结构域融合可增强 CAR-NK 细胞功能，因为 DAP12 是激活 NKG2D 受体的内源性信号。表1比较了 CAR-NK 细胞和 CAR-T 细胞 。

表1. CAR-NK和CAR-T细胞之间的差异。

4. CAR-NK细胞在癌症治疗中的应用现状

近年来，CAR-NK细胞疗法作为一种有前景的癌症治疗方法受到越来越多的关注，临床试验入组患者的数量也在不断增加。这一趋势有助于更全面地评估CAR-NK细胞疗法的疗效和安全性。表2总结了CAR-NK细胞疗法在癌症治疗中的部分应用 。

表2. CAR -NK细胞临床试验不完整总结。

4.1 实体瘤中的CAR-NK细胞

已有多项综述探讨了CAR-NK细胞在癌症治疗中的应用。就实体瘤而言，抗原的多样性和癌症类型的日益多样化带来了挑战。抗HER2基因工程化的NK细胞已被开发用于治疗乳腺癌。对于胶质母细胞瘤，抗HER2-NK92细胞正在研究中，目前正在进行一项临床试验(NCT03383978)。在胃癌中，抗HER2-NK92细胞已在临床前研究中被证实与阿帕替尼具有协同作用。此外，临床试验正在招募针对胃癌和胰腺癌Claudin 18.2 (CLDN18.2)的CAR-NK细胞患者(NCT06464965)。抗 Robo1-CAR-NK-92 细胞与近距离放射治疗相结合，已被证明可以抑制小鼠模型中的胰腺癌。在放射治疗的协同作用下，用 CXCR2 基因工程改造的抗 CPG3-NK92 细胞对肝细胞癌 (HCC) 表现出强大的细胞毒性，尽管抗肿瘤效果因不同的放射剂量而异。抗 GPC3-NK 细胞将在临床试验 (NCT06652243) 中对原发性 HCC 志愿者进行测试。在结直肠癌中，通过局部输注给三名晚期患者注射 NKG2D-CAR-NK 细胞，导致靶向 NKG2D 配体的肿瘤消退。抗 HER1-CAR-NK 细胞对头颈部鳞状细胞癌表现出强大的肿瘤杀伤活性，但 CD44v6 表达的上调可能需要多靶点联合治疗方法。

4.2 CAR-NK细胞在血液系统肿瘤中的应用

在血液系统恶性肿瘤中，CAR-NK 细胞免疫疗法已显示出良好的效果。在多发性骨髓瘤 (MM) 中，发现 CS1-CAR-NK 细胞可有效抑制肿瘤细胞增殖，并在同种异体移植模型中显著提高肿瘤小鼠的生存率。此外，三种靶向 CD19 的 CAR-NK 细胞已证明对肿瘤细胞具有选择性细胞毒性。GPRC5D 和 BCMA (NCT06045091) 也正在被探索作为替代靶点。Yang 等人最近的一项研究表明，即使在没有靶抗原的情况下，靶向 CD19/CD20 的 CAR-NK 细胞也表现出对急性淋巴细胞白血病 (ALL) 的增强细胞毒性。

虽然临床前和临床试验的数据表明，CAR-NK 细胞在治疗实体肿瘤方面表现出显著的疗效和安全性，但仍有几个挑战有待解决，如下所述。

5. 目前改进和优化CAR-NK细胞的策略

CAR-NK 细胞的优势在于可以避免 CAR-T 细胞常见的问题，例如移植物抗宿主病 (GVHD) 和细胞因子释放综合征 (CRS)。然而，增强 CAR-NK 细胞对肿瘤细胞的靶向杀伤能力仍是一项重大的研究挑战。本综述探讨了目前旨在提高 CAR-NK 细胞疗效的策略，为未来的技术进步提供了潜在的方向。这些方法总结在图2中。

图2. CAR-NK细胞现有的部分增强策略 | icasp9自杀基因的引入。必要时注射二聚化剂终止CAR-NK细胞作用(A)；双靶向(B)；RNA电穿孔转染增强CAR分子活性(C)；IL-15/IL-15Rα支持增强CAR-NK细胞持久性(D)。

5.1 增强CAR-NK细胞的可持续性

CAR-NK 细胞的寿命相对较短，通常约为 2 周，这为其完全完成肿瘤细胞清除的能力带来了挑战。延长 CAR-NK 细胞在体内的持久性对于增强其靶向肿瘤组织的有效性至关重要。最近一项关于第四代 CAR 分子的研究通过构建表达 CAR.19-IL-15/IL-15Rα 的 NK 细胞解决了这一问题，该 NK 细胞表现出增强的增殖能力和对 CD19 阳性 Raji 细胞系的强大细胞毒性。然而，需要进一步评估以平衡延长 NK 细胞持久性与潜在的非肿瘤组织毒性风险，下文将详细讨论。

5.2 解决CAR-NK细胞疗法中癌症抗原表达低的问题

在没有明显病理状况的情况下，肿瘤细胞可能由于其表面金属剪切酶的作用而脱落其特异性靶向分子。这一过程不仅减少了肿瘤细胞表面特异性靶向蛋白的存在，还导致CAR-NK细胞表面活化受体被掩盖。因此，CAR-NK细胞有效杀伤肿瘤细胞的能力受到损害，从而导致疗效降低。

为了克服这些挑战，一种方法是多靶向肿瘤细胞以增强其消除能力。Zhang 等人最近的一项研究开发了靶向 NKG2DL 和 ErbB2 的 CAR-NK 细胞，以解决可溶性 NKG2DL 干扰的问题。双特异性 CAR 结构为癌症抗原下调和精准度不足的问题提供了解决方案。此外，RNA 电穿孔转染已显示出通过实现瞬时 CAR 表达来解决潜在免疫逃逸途径的前景。该方法已被发现可以暂时增强 CAR 活性，从而增强 CAR-NK 细胞的细胞毒能力。靶向 NKG2D 配体的 NKG2D-CAR-NK 细胞已应用于结直肠癌患者，其中电穿孔可增加 NKG2D 表达并提高肿瘤细胞杀伤力。此外，最近的报告表明，脂质纳米颗粒 (LNP) 转染脐带血来源的 NK 细胞可能比电穿孔更具优势，尽管需要进一步评估 mRNA-LNP 处理的 NK 细胞的受体功能。

5.3 对抗脱靶效应

由于肿瘤细胞中抗原表达较低，增强CAR-NK细胞过度表达特定配体的策略会引入显著的脱靶效应风险。肿瘤抗原在非肿瘤组织中的表达（尽管量很少）是其固有特性。具体而言，许多在肿瘤细胞表面高表达的靶蛋白也存在于正常组织细胞中。例如，巨噬细胞和树突状细胞也表达NKG2DL。CAR-T细胞和CAR-NK细胞疗法均易受脱靶效应的影响，这凸显了CAR-NK细胞治疗的潜在风险。虽然CAR-NK细胞的寿命通常较短，约为2周，从而限制了潜在损害，但非肿瘤毒性的可能性仍然令人担忧。诸如使CAR-NK细胞可调等技术进步，提供了一种减轻脱靶效应的方法。近期研究已证明在CAR-NK构建体中整合自杀基因（例如icasp9自杀开关）的可行性。对于需要反复输注CAR-NK细胞的患者，可通过施用化学药物来控制非肿瘤毒性，这些药物可在CAR-NK细胞完成治疗作用后迅速终止其活性，从而最大限度地减少其对健康组织的影响。此外，利用icasp9自杀基因改造由IL-15支持以延长其寿命的CAR-NK细胞，从而提供一种精细的方法，在有效清除肿瘤细胞的同时最大限度地降低非肿瘤毒性。

6. CAR-NK细胞治疗妇科癌症的现状

宫颈癌、子宫内膜癌和卵巢癌是最常见的妇科恶性肿瘤，发病率和死亡率均高。宫颈癌是最常见的妇科癌症，是仅次于乳腺癌的女性癌症死亡的第二大原因，贫困县宫颈癌患者的死亡率是富裕县的两倍。子宫内膜癌是女性第四大常见癌症，也是女性癌症死亡的第五大原因。卵巢癌占所有癌症病例的3.6%，但占所有癌症死亡人数的4.3%，是仅次于宫颈癌的妇科癌症死亡的第二大原因，是女性第七大常见癌症，也是女性第八大癌症死亡原因。由于以CAR-T为代表的免疫治疗策略在血液系统恶性肿瘤和其他实体肿瘤中取得了显著进展，因此，将免疫治疗应用于妇科癌症治疗对女性健康更加迫切。

在CAR-T疗法治疗妇科癌症的领域，我们目前处于什么位置以及未来将走向何方，这非常值得我们思考。总体而言，CAR-T疗法在妇科癌症治疗中的研究比CAR-NK细胞疗法更为广泛。

6.1 CAR-NK细胞治疗在子宫内膜癌领域的发展前景

子宫内膜癌是发达国家女性生殖系统最常见的恶性肿瘤，在中国居第二位。复发或转移性子宫内膜癌的标准一线化疗是卡铂联合紫杉醇，但患者预后仍然不佳，中位无进展生存期不足 2 年。尽管多种实体肿瘤的生存率有所提高，但近年来子宫内膜癌的预后并未取得显著进展。随着对 II 型子宫内膜癌独特的分子和基因组特征以及这些肿瘤免疫微环境认识的不断加深，迫切需要分子靶向治疗或免疫治疗。虽然针对子宫内膜癌的生物标志物驱动的靶向治疗发展缓慢，但免疫疗法的进步显得更为重要。 MISIIR因其对女性生殖系统的特异性而成为一个有前景的靶点，并可作为子宫内膜癌的有效靶点。最近的研究表明，MISIIR在卵巢癌和子宫内膜癌中均过表达，但在正常组织细胞中不表达。靶向MISIIR的CAR-T细胞已在裂解MISIIR过表达的宫颈癌模型小鼠和患者来源的肿瘤细胞方面显示出显著的成功。

6.2 卵巢癌CAR-NK细胞治疗现状及发展前景

卵巢癌，尤其是上皮性卵巢癌，早期诊断较为困难，导致大多数病例确诊时已为晚期。因此，由于治疗方案有限，预后通常不佳。肿瘤减容手术和铂类化疗仍然是主要的治疗方法；然而，治疗后复发率较高，这凸显了对新型、更有效治疗方法的迫切需求。

用于改造卵巢癌（尤其是上皮性卵巢癌）T 细胞或 NK 细胞的抗原和 CAR 设计策略用途广泛。由于特异性或相关抗原的广泛鉴定，卵巢癌抗原靶向治疗的进展加快。例如，一项研究开发了针对 CD133 阳性卵巢癌细胞的抗 CD133-CD28-41BB-CD3ζ-CAR-NK92 细胞，而另一项研究设计了抗 CD24-CD28-41BB-CD3ζ-CAR-NK92 细胞，以选择性清除 CD24 阳性卵巢癌细胞。CD133 和 CD24 都是适用于其他癌症的癌症干细胞标记物。叶酸受体α (FRα) 在 90% 的卵巢癌中过表达，第二代 CAR-NK92 细胞已将其作为靶点，对 FRα 阳性的卵巢癌细胞表现出强大的细胞毒性。此外，源自 iPSC 的抗间皮素 CAR-NK 细胞已被证明能够在卵巢癌异种移植模型中抑制癌症生长。

6.3 CAR-NK细胞治疗在宫颈癌领域的发展前景

CAR-NK 细胞疗法尚未应用于宫颈癌。然而，其他免疫治疗方法正在探索中，主要侧重于针对 HPV 相关抗原的靶向治疗，因为大多数宫颈癌是由明确的高危 HPV 相关发病机制驱动的。C1P5（抗 HPV E6）和 TVG701Y（抗 HPV E7）等单克隆抗体已被研究，并被证明能够抑制宫颈癌小鼠模型中的肿瘤生长。近年来，免疫检查点抑制剂在治疗宫颈癌方面的有效性有所提高，免疫检查点抑制剂与 HPV 治疗性疫苗、化疗或放疗的联合治疗正在考虑用于临床。帕博利珠单抗已获批用于治疗 PD-L1 阳性宫颈癌。宫颈癌CAR-T细胞疗法已靶向多种抗原，包括GD2、PSMA、Muc1和间皮素（ClinicalTrials.gov标识符：NCT03356795和NCT01583686）。此外，HER2靶向CAR-T细胞已在宫颈癌临床试验中得到评估，临床前研究则集中于CD47。

与其他实体瘤相比，CAR-T细胞疗法在宫颈癌中的应用相对有限，这可归因于此类癌症缺乏特异性且专属性的癌症相关抗原。理想的CAR靶向候选抗原应在癌细胞中广泛表达，而在正常组织中缺失或极微表达。HER2在宫颈癌中的过表达率为38%-94%，间皮素的过表达率约为25%，是目前CAR-T细胞在宫颈癌中的主要靶向抗原。

7. 结论

本综述探讨了NK细胞的关键作用，并比较了CAR-NK细胞疗法与CAR-T细胞疗法。在众多临床和临床前研究中，CAR-NK细胞已显示出与CAR-T细胞相当的肿瘤靶向效力。然而，CAR-NK细胞具有独特的优势，例如能够避免治疗过程中的许多常见毒性，包括细胞因子释放综合征（CRS）和移植物抗宿主病（GVHD）。尽管这些结果令人鼓舞，但在优化CAR-NK细胞疗法方面仍存在一些挑战。为了解决癌症抗原下调的问题，可以考虑多靶点靶向或增强CAR表达等策略。为了延长CAR-NK细胞的疗效，可以探索细胞因子支持；为了提高其可调控性，引入自杀基因可能是一个可行的解决方案。随着各种创新方法的不断涌现，CAR-NK细胞疗法在妇科肿瘤学中的应用仍处于早期阶段。然而，随着各种生物技术的进步，CAR-NK疗法作为免疫疗法中的重要一环，有望开启癌症治疗的新纪元，为大量患者的治愈带来希望。